Elisa试剂盒

Elisa试剂盒

　　酶联免疫吸附测定（Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay,ELISA）作为一种广泛应用的免疫检测技术，在临床诊断、疾病研究、食品安全检测以及环境监测等多个领域发挥着至关重要的作用。其核心是利用抗原-抗体特异性结合的原理，并通过酶促化学反应将这种结合转化为可定量或定性测量的信号。根据实际检测需求的不同，ELISA试剂盒的设计呈现多样化的特点，包括但不限于双抗体夹心法、间接法、竞争法、双位点一步法、捕获法测IgM抗体以及应用亲和素-生物素系统的ELISA等。

　　1.双抗体夹心法（Sandwich ELISA）

　　在双抗体夹心法中，首先将针对目标抗原的捕获抗体固定于固相载体上形成固相抗体层，然后加入待测样本使得抗原与固相抗体结合。洗涤去除未结合的成分后，再加入能与抗原另一表位结合的酶标抗体。经过进一步的温育和洗涤步骤，最后通过酶催化底物反应生成有色产物，颜色深浅与样本中的抗原含量成正比，从而实现定量分析。

　　2.间接法ELISA

　　间接法ELISA中，固相载体上的抗体同样用于捕获抗原，但后续步骤有所不同。此处不是加入酶标抗体，而是先加入待测样本并允许抗原与抗体结合后，再添加酶标记的抗体（通常为抗物种抗体），它与样本中的抗体结合而非直接与抗原结合。这种方法的优势在于它可以检测多种类型的抗体，但由于增加了步骤，可能面临交叉反应和背景较高的风险。

　　3.竞争法ELISA

　　竞争法ELISA中，待测样本和酶标记的抗原同时与有限的抗体结合。样本中的抗原和酶标抗原竞争结合同一个抗体位点，因此，样本中抗原浓度越高，结合到固相抗体的酶标记抗原就越少，最终产生的颜色强度越弱。此法适用于测定小分子抗原或多肽类物质。

　　4.双位点一步法ELISA

　　在这种设计中，抗原和酶标抗体预先偶联形成复合物，然后一起加入到固相抗体预包被的板孔中。如果待测样本中含有相同抗原，则会竞争结合固相抗体，导致酶标抗原-抗原复合物的结合减少。随后的酶催化反应及显色步骤可用于定量分析。

　　5.IgM抗体捕获法

　　专门用于检测IgM类抗体的捕获法，通过固相包被抗人IgM抗体，使样本中的IgM首先结合到固相上，之后加入抗原以捕获与IgM特异性结合的部分，再通过酶标抗体检测。此法特别适合于急性感染早期的IgM抗体检测。

　　6.亲和素-生物素系统（ABC-ELISA）

　　利用亲和素对生物素很高的亲和力，可以将生物素标记到抗体或抗原上，而酶则标记在亲和素上。这样既简化了标记步骤，又提高了灵敏度和特异性。

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